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如何形成厭氧培養(yǎng)箱操作室的環(huán)境

日期:2025-07-11 10:25
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摘要:

厭氧培養(yǎng)箱是一種可在無氧環(huán)境下進(jìn)行**培養(yǎng)及操作的專用裝置,可培養(yǎng)*難生長的厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。

  1. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置,應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備,放置平穩(wěn);

  2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當(dāng)位置;

  3. 接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合;

  一、皓莊厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成:

  1. 按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋;

  2. 通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度及**溫度;

  3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉);

  4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗;

  5. 操作室內(nèi)**次置換(氮氣置換):

  A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,另一頭插入塑料袋;

  B. 接通氮氣進(jìn)氣路,打開氮氣控制閥1,使二只塑料袋充足氮氣,關(guān)閉閥門1,然后扎緊袋口;

  C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;

  D. 把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸放于操作室內(nèi),至全部放出。

  6. 操作室**次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。

  7. 操作室第三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)

  A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣;

  B. 混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣閥并打開閥5,使混合氣經(jīng)過流量計,調(diào)整流量計,流量為每分鐘10ml左右;

  C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi);

  D. 通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

  8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變**況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;

  9. 開紫外線**燈,室內(nèi)進(jìn)行**處理,**時間按具體實驗自定。

  2、菌種的置入和培養(yǎng):

  1. 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之;

  2. 打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門;

  3. 取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮氣閥2進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥2。**次重復(fù)操作一次。第三次操作時,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進(jìn)混合氣,使指針回復(fù)零位,后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束;

  4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);

  5. 取樣室內(nèi)外門開啟、關(guān)緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;

  6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:

  A. 每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,如不正常就必須重新?lián)Q氣;

  B. 要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補(bǔ)進(jìn)的氮氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,保證室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;

  C. 連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行**,更換一次除氧劑和干燥劑。

  7. 操作室內(nèi)培養(yǎng)室內(nèi)室溫度可任意選擇和控制。

  8. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。

  注意事項

  1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;

  2. 開機(jī)前應(yīng)**熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;

  3. 培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到**厭氧環(huán)境后放入;

  4. 如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理);

  5. 經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;

  6. 調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;

  7. 真空泵按要求使用,定期檢查加油。

蘇公網(wǎng)安備 32048202000235號

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